Yeni izole edilen bacillus licheniformis KG9’dan β- galaktozidazın üretimi, kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2013
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Batman Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Batman’da (Taşlıdere, Türkiye) kaplıca sularından izole edilen, Bacillus
licheniformis KG9 yeni bir ekstrasellüler β-galaktozidazın üretimi için büyük bir
potansiyele sahiptir. Kültür koşulları ve ortam optimizasyonu NB (Nutrienth broth) β-
galaktozidaz enziminin üretimi için gerekli olduğunu ortaya çıkarmıştır. Termostabil
ekstrasellüler bir enzim olan β-galaktozidaz amonyum sülfat çöktürmesi ve diyaliz ile
kısmen saflaştırılmıştır. Enzimin spesifik aktivitesi 1631 U/mg proteinden 19030.45
U/mg proteine yükseltilmiştir. Kısmi saflaştırılmış enzimin moleküler ağırlığının nondenatüre
poliakrilamid jel elektroforezi ile 116 kDa’dan az olduğu tespit edilmiştir.
Laktoz içeren ve içermeyen ortamlarda, çalkalama şişelerinde büyümenin daha sonraki
aşamalarında (96 saat) enzim aktivitesinde önemli bir üretim seviyesi belirlenmiştir,
bunlar sırasıyla (2.45 U/mg protein) ve (3.25 U/mg protein)’dir. Enzim için optimum
pH ve sıcaklık 8.0 ile 55 °C’dir. Kullanılan çeşitli karbon ve azot kaynakları arasında,
karbon kaynaklarının enzim üretimini arttırmadığı ancak laktozun araştırılan diğer
karbon kaynaklarından daha yüksek aktivite gösterdiği belirlenmiştir oysa, azot
kaynaklarından glisin ve amonyum sülfat enzim üretimini hafif bir şekilde
yükseltmiştir.
Bacillus licheniformis KG9 isolated from the waters of the hot spring (Taşlıdere, Turkey) in Batman, has a great potential for the production of a novel extracellular β- galactosidase. Optimization of culture conditions and media revealed that NB (Nutrienth broth) is essential for the production of β-galactosidase. An extracellular thermostable β-galactosidase has been partially purified by ammonium sulphate precipitation and dialysis. The specific activity of the enzyme was increased from 1631 U/mg protein to 19030.45 U/mg protein. The molecular mass of the partially purified enzyme as determined by non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis was an approximately less than 116 kDa. In the lactose-absence medium and lactose-presence medium, production of a significant level of enzyme activity was determined (2.45 U/mg protein) and (3.25 U/mg protein) next stages of growth (96h) in a shake flasks, respectively. The pH and temperature optima for the enzyme are 8.0 and 55°C. Among the various carbon and nitrogen sources used, carbon sources didn’t increase the enzyme production but lactose showed higher activity than the other investigated carbon sources, whereas the nitrogen sources glycine and ammonium sulphate slightly increased enzyme production.
Bacillus licheniformis KG9 isolated from the waters of the hot spring (Taşlıdere, Turkey) in Batman, has a great potential for the production of a novel extracellular β- galactosidase. Optimization of culture conditions and media revealed that NB (Nutrienth broth) is essential for the production of β-galactosidase. An extracellular thermostable β-galactosidase has been partially purified by ammonium sulphate precipitation and dialysis. The specific activity of the enzyme was increased from 1631 U/mg protein to 19030.45 U/mg protein. The molecular mass of the partially purified enzyme as determined by non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis was an approximately less than 116 kDa. In the lactose-absence medium and lactose-presence medium, production of a significant level of enzyme activity was determined (2.45 U/mg protein) and (3.25 U/mg protein) next stages of growth (96h) in a shake flasks, respectively. The pH and temperature optima for the enzyme are 8.0 and 55°C. Among the various carbon and nitrogen sources used, carbon sources didn’t increase the enzyme production but lactose showed higher activity than the other investigated carbon sources, whereas the nitrogen sources glycine and ammonium sulphate slightly increased enzyme production.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Bacillus licheniformis KG9, β-galaktozidaz, Enzim üretimi ve karakterizasyonu, β–Galactosidase, Enzyme production and characterization
Kaynak
WoS Q Değeri
Scopus Q Değeri
Cilt
3
Sayı
2
Künye
Kaplan, A., Gül Güven, R., Güven, K. (2013). Yeni izole edilen bacillus licheniformis KG9’dan β- galaktozidazın üretimi, kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu. Batman Üniversitesi Yaşam Bilimleri Dergisi, 3 (2), ss. 39-51.
